Roberto A. Ribas Zunino

Roberto A. Ribas Zunino / Investigación / Imagen MALDI de la cóclea

Primer autor · Journal of the American Society for Mass Spectrometry · 2026

Imagen MALDI de la cóclea

Un método como primer autor (J Am Soc Mass Spectrom, 2026) que hace práctica la imagen de metabolitos y lípidos de la cóclea de ratón con alta resolución espacial.

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El problema

La cóclea es diminuta, está envuelta en hueso y contiene muchos tipos celulares distintos, por lo que es difícil cortarla y analizarla sin perder la información molecular que se busca. Los métodos en bloque promedian esa heterogeneidad.

Lo que desarrollamos

Un flujo de trabajo simplificado de preparación y procesamiento de muestras para imagen por espectrometría de masas MALDI (MALDI-MSI) de la cóclea de ratón. Redujimos la obtención de muestras al mínimo de pasos para usar directamente cabezas de ratón neonatal congeladas rápidamente, cortadas en sentido sagital en el criostato.

La matriz (NEDC, diclorhidrato de N-(1-naftil)etilendiamina) se aplicó por sublimación con recristalización controlada y se comparó directamente con la pulverización automática. La sublimación dio mejor relación señal-ruido en cerca de dos tercios de los iones asignados, sobre todo lípidos y ácidos grasos, y una resolución efectiva cercana a 5 µm frente a 10–15 µm con pulverización; la pulverización siguió siendo mejor para algunos metabolitos polares como el aspartato. La imagen se adquirió en un timsTOF fleX, con anotación por bibliotecas espectrales, sección eficaz de colisión y MS/MS.

Lo que mostró

Se mapearon diversos metabolitos y lípidos en la región coclear con distribuciones espaciales distintas. El agrupamiento no supervisado recuperó regiones fisiológicas reproducibles, como la cápsula ótica y los conductos espirales. Algunas moléculas estaban en lugares muy concretos: un sulfátido concentrado en el órgano de Corti, y el ADP aparecía más alto en la endolinfa que en la perilinfa. El artículo propone usar el método para comparar la pérdida auditiva genética, por ruido y por fármacos, y para estudiar otras estructuras pequeñas y complejas.

Mi papel

Primer autor. El método surgió del Center for Advanced Spatial Biomolecule Research de UF, donde realizaba imagen MALDI timsTOF a diario. El mismo enfoque de sublimación y recristalización de NEDC aparece en la Nota de Aplicación 69 de HTX Imaging, donde figuro como contribuidor de datos.

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